色譜儀系統(tǒng)在藥物研發(fā)中具有舉足輕重的作用，色譜數(shù)據(jù)完整性和合規(guī)性直接決定藥品注冊成敗。本文是氣相色譜儀廠家山東譜析基于多年藥物分析經(jīng)驗對色譜數(shù)據(jù)完整性理論的簡淺總結(jié)，不妥之處，還望指正！
數(shù)據(jù)完整性是指數(shù)據(jù)和流程在其整個生命周期中的整體完整性、準確性和一致性。
雖然這看起來很簡單，但真正以完整性和準確性生成、維護和轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)的整個過程對于任何從事藥物制造者來說都是一項具有挑戰(zhàn)性的任務(wù)。而色譜數(shù)據(jù)完整性更是體現(xiàn)在色譜系統(tǒng)、對照品管理、樣品管理、原始記錄管理以及Excel驗證等方面。
色譜系統(tǒng)
色譜工作站
色譜工作站獲得的色譜數(shù)據(jù)應(yīng)當可靠、安全、完整、可溯源。藥物制造者應(yīng)該選擇、安裝和使用適合其既定用途的色譜系統(tǒng)，并可以得到穩(wěn)定的售后服務(wù)。系統(tǒng)應(yīng)符合法規(guī)要求和GMP要求，包括但不僅限于，確保數(shù)據(jù)采集、處理和存貯符合國家法律和可追溯、清晰、同步、原始和準確的原則。鼓勵采用經(jīng)規(guī)范和系統(tǒng)驗證的色譜工作站進行研究工作，但并不是說非要使用安捷倫系列、Empower、Solutions系列等軟件。不過國內(nèi)色譜工作站的靠譜性值得商榷。目前國內(nèi)大中型藥物制造從事者大部分已經(jīng)采用了本地無數(shù)據(jù)儲存的網(wǎng)絡(luò)版工作站，確保了數(shù)據(jù)的安全性、可靠性和完整性。
驗證與確認
色譜儀系統(tǒng)在進行藥物制造行為前需要按照經(jīng)過批準的驗證方案進行驗證。色譜系統(tǒng)驗證和確認的范圍和程度應(yīng)根據(jù)風險管理原則確定。驗證和確認應(yīng)在方案中進行說明，并記錄在報告中。報告中應(yīng)包括文件化證據(jù)，如截屏、打印輸出或其它作為驗證和確認的一部分所執(zhí)行檢測的源數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)應(yīng)提供證據(jù)證明系統(tǒng)性能一致性，以及結(jié)果可靠準確。參數(shù)（例如但不僅限于密碼控制、審計追蹤、訪問和權(quán)限）應(yīng)在驗證和確認時說明并核對。如發(fā)現(xiàn)任何校正參數(shù)超出校準范圍或不符合既定限度，則應(yīng)進行根本原因分析、影響性分析和風險評估。應(yīng)采取適當?shù)腃APA。
1）新購氣相色譜儀、液相色譜儀系統(tǒng)需要進行驗證，并組織好相關(guān)文件的撰寫和審評，下圖是相關(guān)文件梳理。
當然上述所有行為均是由總驗證計劃所決定的，有些色譜實驗室還將操作確認和性能確認合并成OPQ或?qū)惭b確認和操作確認合并成IOQ，但一般不建議將三者合并形成IOPQ。具體詳見筆者撰寫的《色譜系統(tǒng)驗證和確認理論》。
2）舊色譜儀系統(tǒng)應(yīng)該約定周期性進行期間核查進行再確認，已確定系統(tǒng)是否滿足使用。每年需經(jīng)具有鑒定資格的鑒定機構(gòu)對儀器進行鑒定并出具合格證。
訪問與權(quán)限
1) Windows賬戶應(yīng)只有一個管理員賬戶，管理員賬戶僅限于系統(tǒng)維護使用。對于每個實驗人員應(yīng)該分別有自己獨立的賬戶和密碼，每個賬戶僅有寫入和讀取權(quán)限。所有賬戶應(yīng)該設(shè)置計算機屏幕保護，并在短時間內(nèi)自動鎖屏。即使管理員也不應(yīng)該具備刪除數(shù)據(jù)，更改系統(tǒng)時間的權(quán)限。
2）工作站應(yīng)有標準操作程序（SOP）規(guī)定色譜儀系統(tǒng)用戶組和用戶的創(chuàng)建與刪除，寫明為每個用戶所分配的權(quán)限。記錄應(yīng)保存。每個組內(nèi)的用戶應(yīng)有適當資質(zhì)可承擔指定的職責和權(quán)限。用戶組、用戶及其權(quán)限的手工記錄應(yīng)與電子數(shù)據(jù)相一致。應(yīng)該建立一個關(guān)于密碼的SOP。工作站在無操作時應(yīng)短期內(nèi)鎖定。即使管理員也不應(yīng)該具備刪除數(shù)據(jù)的權(quán)限。
審計追蹤
以往我們使用的ChemStation、Solution等工作站并不具備審計追蹤功能，隨著藥物審查的日益嚴格，大部分色譜工作站廠家均升級了自己的工作站。目前國內(nèi)各大型藥企均已配備具備審計追蹤功能的色譜工作站。在色譜工作安裝開始即應(yīng)全面激活審計追蹤功能，并在色譜系統(tǒng)的生命周期中保持一致處于激活狀態(tài)。審計追蹤應(yīng)根據(jù)SOP進行審核。應(yīng)有證據(jù)證明對審計追蹤進行了日常（每次色譜分析）和定期審核。審計追蹤是元數(shù)據(jù)的一部分，應(yīng)作為所有色譜數(shù)據(jù)系列一并存貯。下表是筆者對色譜實驗室審計追蹤的基本要求做簡單總結(jié)概括：
簽名
目前可以校驗個人身份的方式主要有：手簽名、電子簽名、生物測定學以及數(shù)字簽名。其中電子簽名是色譜儀系統(tǒng)中常用的方式。電子簽名是指一種有一個人執(zhí)行、采用或批準成為與其個人的手寫簽名具有相同的法律效力的計算機數(shù)據(jù)的任意符號或一系列符合的編譯。下表是電子簽名的一般要求
色譜柱
色譜柱是色譜系統(tǒng)中的核心部分，在進行藥物制造行為時應(yīng)選用合適的經(jīng)過批準的供應(yīng)商提供的色譜柱，新收到色譜柱應(yīng)該進行驗收（包括柱效測試）并形成記錄歸檔。應(yīng)該建立色譜柱使用檔案（因至少包括使用時間區(qū)間、用途、使用狀況、蕞后封存液體等）。每次實驗應(yīng)該詳細記錄色譜柱信息。應(yīng)該按照經(jīng)批準的色譜柱再生SOP進行再生。退役色譜柱應(yīng)該由相關(guān)的退役流程并貼標識統(tǒng)一管理。
溶劑及流動相
溶劑、緩沖液和流動相制備、存貯和使用應(yīng)根據(jù)批準的質(zhì)量標準、程序和藥典。應(yīng)在其經(jīng)過驗證的有效期內(nèi)使用。詳細記錄配制過程并準確記錄所用到化學品、試劑和其他物料的信息（至少包括廠牌、批號、級別等）。溶劑及流動相的使用應(yīng)該按照SOP操作。
色譜方法
1）采集方法
詳細記錄采集方法開發(fā)過程并且對確定的采集方法進行詳細的方法學驗證，這些工作應(yīng)由有資質(zhì)有經(jīng)驗的人員按要求進行。經(jīng)過方法學驗證后的采集方法應(yīng)盡可能由指定人員創(chuàng)建和保存在色譜系統(tǒng)中。采集方法不應(yīng)隨意進行修訂，如需修訂應(yīng)由授權(quán)人員根據(jù)其意向目的進行批準，修改后重新進行方法學驗證才可以進行產(chǎn)生效力的樣品測定。應(yīng)規(guī)定樣品序列，對照液、樣品溶液和空白溶液進樣瓶應(yīng)進行核對以確保色譜系統(tǒng)進樣序列正確。
蕞好不要“試針”、“系統(tǒng)檢查進針”或其它未規(guī)定作為樣品序列一部分的進針。例外情形需要使用時，應(yīng)在批準程序里清楚說明。但只有對照溶液可以用于此目的，樣品是絕對不能進行“試針”檢查的。蕞好記錄進樣前序列表和進樣后序列表，這樣可以對比進樣前后的實際情況，除非色譜工作站具有此功能。每個樣品序列表應(yīng)單獨跟蹤空白對照，可以監(jiān)測是否會產(chǎn)生干擾。應(yīng)該制定系統(tǒng)適用性的可接受范圍。
2）處理方法
所采集的結(jié)果應(yīng)使用經(jīng)過驗證的方法進行處理。所選方法應(yīng)可追溯，并反映在審計追蹤里。處理方法應(yīng)該符合可追溯、清晰、同步、原始和準確的原則。處理方法應(yīng)該根據(jù)實際情況調(diào)整斜率靈敏度、噪聲閾值、峰寬、峰面積閾值和集束因子及撇去比率的參數(shù)。一般來說色譜峰準確積分的必要條件是所有峰能完全分離。如果必須從未分開的峰中獲得定量數(shù)據(jù)，則實驗室應(yīng)制訂明確的方針說明如何對這些峰進行積分。其中應(yīng)包括闡明何時可使用不同函數(shù)對未分離的峰進行積分。
如撇去設(shè)置、通過設(shè)置峰谷比和峰高比來調(diào)整等。一般來說是不建議手動積分的，非要進行手動積分應(yīng)該按照建立的手動積分SOP進行并保存好記錄。自動積分和手動積分的譜圖必須同時保存。手動積分應(yīng)該按蕞差情況積分。積分過程中的平滑處理是要經(jīng)過論證處理的。色譜系統(tǒng)應(yīng)該獨立保存每次數(shù)據(jù)處理后的結(jié)果并且保證每次結(jié)果可讀。同一樣品序列應(yīng)該使用同一個處理方法。
數(shù)據(jù)管理
所有數(shù)據(jù)在災(zāi)難（如儀器故障、病毒、硬件或軟件故障和斷電）發(fā)生時可恢復(fù)。所獲取的色譜數(shù)據(jù)應(yīng)可追溯、清晰、原始和準確。數(shù)據(jù)應(yīng)根據(jù)程序備份，記錄應(yīng)保存作為證據(jù)。應(yīng)特別注意確保單機系統(tǒng)數(shù)據(jù)備份要頻繁，以防止數(shù)據(jù)遺失。數(shù)據(jù)應(yīng)安全存貯，包括對數(shù)據(jù)訪問進行控制。備份數(shù)據(jù)應(yīng)按指定時間間隔隨機抽取進行恢復(fù)和驗證。完整數(shù)據(jù)應(yīng)保存適當時長，期間可進行數(shù)據(jù)核查、注冊申報或其它。
對照品管理
對接收的對照品需進行驗收（對照品名稱、數(shù)量、有效期、供應(yīng)商、外觀狀態(tài)、純度復(fù)核及對照品證書），合格后進行登記入賬，并按說明書或指定的儲存條件嚴格儲存。一般按標準品的規(guī)定貯存期限執(zhí)行，沒有期限的原則上化學提純物標準品為3年（生物試劑和不穩(wěn)定的以6～12個月為宜）。對照品純度標定在在驗收時一并進行。
實驗人員根據(jù)項目，領(lǐng)用對照品，對照品管理員根據(jù)標準品存放位置，尋找標準品交于實驗人員。實驗人員初步驗收對照品后，填寫領(lǐng)用記錄，記錄應(yīng)至少包括（對照品名稱、純度、廠家、規(guī)格、批號、領(lǐng)用時間、領(lǐng)用人、用途、領(lǐng)用前質(zhì)量和領(lǐng)用后質(zhì)量等信息）。對照品的第一個開封者，應(yīng)將對照品的開瓶日期、純度、有效期標注于標準品瓶上，并簽名。色譜實驗室用到的所有對照品都應(yīng)該有合理的有效期，對照品的有效期應(yīng)基于廠家提供、歷史數(shù)據(jù)的總結(jié)或穩(wěn)定性研究的結(jié)果。對照品過期或出現(xiàn)異常無法使用時，應(yīng)提出銷毀申請，不能私自處理。
由對照品管理員記錄。記錄內(nèi)容至少包括品名、規(guī)格、數(shù)量、銷毀原因、購入單位、購入日期、申請人、批準人。對照品溶液的配制過程應(yīng)該詳細記錄并標注配置信息、儲存條件及有效期。所用官方、第二或工作對照品應(yīng)可通過保存的記錄追溯其采購、配制、存貯和使用情況。
樣品管理
樣品進入色譜儀實驗室應(yīng)該填寫樣品送檢單（送檢單應(yīng)至少記錄送檢樣品名稱、送檢數(shù)量、批號、送檢人、結(jié)構(gòu)式、儲存條件、外觀及簡單物理性質(zhì)等）。應(yīng)錄入適當記錄，確保樣品詳細信息和分析可追溯。樣品也應(yīng)簡單記錄使用情況，例如使用前質(zhì)量、使用后質(zhì)量、使用日期、用途使用人等。
原始記錄管理
原始記錄管理見筆者撰寫的《依6M分析法形成的藥物科研實驗室中的原始記錄》及《藥物分析測定中修約規(guī)則理論》。在此不做贅述。
Excel驗證
色譜實驗中蕞常用的計算輔助工具就是Excel，Excel也是色譜數(shù)據(jù)完整性必不可少的條件，因此保證Excel數(shù)據(jù)的可追溯、清晰、原始和準確是十分必要的。使用Excel計算一些關(guān)鍵數(shù)據(jù)（產(chǎn)品放行、關(guān)鍵控制指標）前，需要對Excel進行驗證。對于色譜實驗室來說只需要驗證用Excel軟件創(chuàng)建的電子表格中的內(nèi)容。主要包括計算公式、數(shù)據(jù)引用、數(shù)據(jù)檢查、數(shù)據(jù)格式、數(shù)據(jù)精度等。具體驗證理論見筆者撰寫的《色譜實驗室中Excel數(shù)據(jù)可靠性驗證理論》。
結(jié)語
以上是氣相色譜儀廠家山東譜析根據(jù)多年經(jīng)驗并結(jié)合國外理論對色譜實驗室數(shù)據(jù)完整性相關(guān)要求的漫談。保證色譜實驗室的數(shù)據(jù)可追溯、清晰、原始和準確是一項及其復(fù)雜繁重的工作。任何理論性指導(dǎo)原則僅是我們從事色譜行為的基本，只有在實驗中不斷積累經(jīng)驗，養(yǎng)成保證色譜數(shù)據(jù)完整性的習慣，才能真正做出可追溯、清晰、原始和準確的色譜數(shù)據(jù)。更多儀器資訊可與公司在線客服聯(lián)系溝通，也可撥打24小時服務(wù)熱線13276328166 進行聯(lián)系。
